| dbo:abstract
|
- تحليل دورة الخلية من خلال قياس محتوى الحمض النووي هي طريقة تستخدم التدفق الخلوي لتمييز الخلايا في المراحل المختلفة من دورة حياة الخلايا. قبل عملية التحليل، يتم جعل الخلايا قابلة للنفاذ ويتم معالجتها بصبغة فلورية مضيئة والتي تقوم بصباغة الحمض النووي (دي ان ايه DNA)، ومن الامثلة على هذه الصبغات يوديد البوربيديوم (بي آي PI). كثافة الإضاءة في الخلايا المصبوغة تتناسب مع كمية الحمض النووي DNA التي تحتويه طرديا، محتوى الحمض النووي في الخلية يحدد المرحلة اللتي تمر بها الخلية (G0 ,G1, S, G2, M). تنقسم المراحل السابقة إلى جزأين الأول يشمل (G0, G1, S) والثاني يشمل (G2, M) ويتضاعف محتوى الحمض النووي (DNA)في مرحلة S..و يمثل محتوى الحمض النووي (DNA)غالبا على رسم بياني ليقدم معلومات من خلال الترددات التي رسمت لكل مرحلة من مراحل دورة الخلية. بعض الترددات غير الطبيعية يمكن ان تظهر في حال حصل تلف للخلية مهما كان نوعه، مثلا التلف في الحمض النووي (DNA) يمكن ان يقاطع تقدم دورة الخلية عند مراحل معينة، مثل هذا التهديد على تقدم دورة الخلية يمكن ان يؤدي اما إلى اصلاح الحمض النووي (DNA)أو إلى موت الخلية، اصلاح الحمض النووي (DNA)يمكن ان يؤدي إلى تحول الخلية الطبيعية إلى خلية سرطانية، اما موت الخلية فيحصل غالبا من خلال ما يسمى بالاستماتة أو موت الخلية المبرمج (طراز مورفولوجي لموت الخلايا المفردة المتميز بانكماش الخلية وتكثف الكروماتين وتشكل فقاعات هيولية ثم تتجزأ الخلية إلى شدف مرتبطة بالغشاء، ثم تبتلعها البلاعم حتى تختفي).المشاكل التي تواجه الخلية في مراحل (G0 و G1)غالبا ما تكون بسبب قلة المواد الغذائية (مثل الحرمان من الامصال). بدا التعبير عن (تحليل دورة حياة الخلية) في عام 1969 في مختبرات لوس امالوس العلمية من قبل مجموعة من جامعة كاليفورنبا مستخدمين طريقة صبغة فيولجين، أول ببروتوكول لاستخدام صبغة يوديد البوربيديوم في تحليل دورة الخلية كان عام 1975 من خلال اوتار كريشان من كلية هارفرد الطبية وما زالت هذه الطريقة مستخدمة حتى وقتنا هذا. تحليل دورة الخلية متعدد الوسائط يشمل، بالإضافة إلى قياس محتوى الحمض النووي، خصائص أخرى متعلقة بدورة الخلية، مثل القياس المتزامن لمحتوى الحمض النووي (DNA) والحمض الريبي النووي (RNA), أو قياس قابلية الحمض النووي (DNA) للتحطم عند رقم هيدروجيني (PH)منخفض من خلال استخدام صبغة الاكريدين البرتقالية، فتحدد مكونات مرحلة (G1Q, G1A, G1B) وتجعل من الممكن التمييز بين الخلايا في مرحلتي Sو Mو الخلايا المنقسمة. الخلايا في مرحلة (G1Q) تكون خاملة وموجودة بشكل مؤقت في دورة الخلية ويمكن ملاحظتها أيضا في (G0), الخلايا في مرحلة G1A تكون في طور النمو، اما في مرحلة G1B فتكون عبارة عن الخلايا تماما قبل دخولها مرحلة S ويكون نموها (سواء بكمية الحمض النووي الريبي RNA أو البروتين أو حجمها) مشابه للخلايا التي تبدا عملية تضاعف الحمض النووي. يمكن اكتشاف مكونات مشابهة في دورة الخلية من خلال التحليل متعدد الوسائط الذي يشمل قياس التعبير الذي يحدثه السايكلين دي 1 (CYCLIN D1) والسايكلين أي (CYCLIN E) والسايكلين ايه (CYCLIN A) والسايكلين بي 1 (CYCLIN B1). القياس المتزامن لمكونات الحمض النووي ووجود المركب الاولي 5-بروميد-2-دي اوكسي يوريدين من خلال التدفق الخلوي يعتبر طريقة مفيدة بشكل خاص والتي يتم استخدامها بشكل واسع مؤخرا في تحليل الخلية في المختبر أو بالجسم الحي. مع ذلك تحليل وجود 5-ايثينيل-2-دي اوكسي ريودين أصبح الآن الطريقة المفضلة لتحديد وجود الخلايا المضاعفة للحمض النووي في مرحلة S. (ar)
- Analýza buněčného cyklu je aplikací metody průtokové cytometrie. Umožňuje rozlišit buněčnou populaci na skupiny podle fáze buněčného cyklu. Metoda je založená na kvantifikaci buněčné DNA, jejíž množství se mění během jednotlivých fází . Před replikací (fáze G1; G0) je množství DNA u diploidního organismu rovno 2n. Během fáze replikace (S) dochází k zdvojování DNA a množství DNA je >2n. Další fáze, G2 obsahuje množství DNA 4n, stejně jako buňky na počátku mitózy (fáze M). Naměřená data se prezentují ve formě histogramu, kde je vynesen počet buněk proti množství DNA. (cs)
- Cell cycle analysis by DNA content measurement is a method that most frequently employs flow cytometry to distinguish cells in different phases of the cell cycle. Before analysis, the cells are usually permeabilised and treated with a fluorescent dye that stains DNA quantitatively, such as propidium iodide (PI) or 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI). The fluorescence intensity of the stained cells correlates with the amount of DNA they contain. As the DNA content doubles during the S phase, the DNA content (and thereby intensity of fluorescence) of cells in the G0 phase and G1 phase (before S), in the S phase, and in the G2 phase and M phase (after S) identifies the cell cycle phase position in the major phases (G0/G1 versus S versus G2/M phase) of the cell cycle. The cellular DNA content of individual cells is often plotted as their frequency histogram to provide information about relative frequency (percentage) of cells in the major phases of the cell cycle. Cell cycle anomalies revealed on the DNA content frequency histogram are often observed after different types of cell damage, for example such DNA damage that interrupts the cell cycle progression at certain checkpoints. Such an arrest of the cell cycle progression can lead either to an effective DNA repair, which may prevent transformation of normal into a cancer cell (carcinogenesis), or to cell death, often by the mode of apoptosis. An arrest of cells in G0 or G1 is often seen as a result of lack of nutrients (growth factors), for example after serum deprivation.Cell cycle analysis was first described in 1969 at Los Alamos Scientific Laboratory by a group from the University of California using the Feulgen staining technique. The first protocol for cell cycle analysis using propidium iodide staining was presented in 1975 by from Harvard Medical School and is still widely cited today. Multiparameter analysis of the cell cycle includes, in addition to measurement of cellular DNA content, other cell cycle related constituents/features. The concurrent measurement of cellular DNA and RNA content, or DNA susceptibility to denaturation at low pH using the metachromatic dye acridine orange, reveals the G1Q, G1A, and G1B cell cycle compartments and also makes it possible to discriminate between S, G2 and mitotic cells. The cells in G1Q are quiescent, temporarily withdrawn from the cell cycle (also identifiable as G0), the G1A are in the growth phase while G1B are the cells just prior entering S, with their growth (RNA and protein content, size) similar to that of the cells initiating DNA replication. Similar cell cycle compartments are also recognized by multiparameter analysis that includes measurement of expression of cyclin D1, cyclin E, cyclin A and cyclin B1, each in relation to DNA content Concurrent measurement of DNA content and of incorporation of DNA precursor 5-bromo-2'-deoxyuridine (BrdU) by flow cytometry is an especially useful assay, that has been widely used in analysis of the cell cycle in vitro and in vivo. However, the incorporation of 5-ethynyl-2'-deoxyuridine (EdU), the precursor whose detection offers certain advantages over BrdU, has now become the preferred methodology do detect DNA replicating (S-phase) cells. (en)
|
| rdfs:comment
|
- Analýza buněčného cyklu je aplikací metody průtokové cytometrie. Umožňuje rozlišit buněčnou populaci na skupiny podle fáze buněčného cyklu. Metoda je založená na kvantifikaci buněčné DNA, jejíž množství se mění během jednotlivých fází . Před replikací (fáze G1; G0) je množství DNA u diploidního organismu rovno 2n. Během fáze replikace (S) dochází k zdvojování DNA a množství DNA je >2n. Další fáze, G2 obsahuje množství DNA 4n, stejně jako buňky na počátku mitózy (fáze M). Naměřená data se prezentují ve formě histogramu, kde je vynesen počet buněk proti množství DNA. (cs)
- تحليل دورة الخلية من خلال قياس محتوى الحمض النووي هي طريقة تستخدم التدفق الخلوي لتمييز الخلايا في المراحل المختلفة من دورة حياة الخلايا. قبل عملية التحليل، يتم جعل الخلايا قابلة للنفاذ ويتم معالجتها بصبغة فلورية مضيئة والتي تقوم بصباغة الحمض النووي (دي ان ايه DNA)، ومن الامثلة على هذه الصبغات يوديد البوربيديوم (بي آي PI). كثافة الإضاءة في الخلايا المصبوغة تتناسب مع كمية الحمض النووي DNA التي تحتويه طرديا، محتوى الحمض النووي في الخلية يحدد المرحلة اللتي تمر بها الخلية (G0 ,G1, S, G2, M). تنقسم المراحل السابقة إلى جزأين الأول يشمل (G0, G1, S) والثاني يشمل (G2, M) ويتضاعف محتوى الحمض النووي (DNA)في مرحلة S..و يمثل محتوى الحمض النووي (DNA)غالبا على رسم بياني ليقدم معلومات من خلال الترددات التي رسمت لكل مرحلة من مراحل دورة الخلية. (ar)
- Cell cycle analysis by DNA content measurement is a method that most frequently employs flow cytometry to distinguish cells in different phases of the cell cycle. Before analysis, the cells are usually permeabilised and treated with a fluorescent dye that stains DNA quantitatively, such as propidium iodide (PI) or 4,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI). The fluorescence intensity of the stained cells correlates with the amount of DNA they contain. As the DNA content doubles during the S phase, the DNA content (and thereby intensity of fluorescence) of cells in the G0 phase and G1 phase (before S), in the S phase, and in the G2 phase and M phase (after S) identifies the cell cycle phase position in the major phases (G0/G1 versus S versus G2/M phase) of the cell cycle. The cellular DNA content (en)
|
