| dbo:abstract
|
- التهجين الموضعي (بالإنجليزية: In situ Hybridization) هي وتقنية وراثية خلوية تستخدم للتحري عن تسلسل معين من الدنا أو الرنا في نسيج ما ولهذا السبب سميت بالتهجين الموضعي. يتم تحديد مكان هذا التسلسل باستخدام مسبار متمم للتسلسل المراد تحديد مكانه. تبدأ العملية بتثبيت العينة المراد فحصها بطور معين لتسهيل دخول المسبار للخلية واتحاده مع التسلسل المتمم، تُغسل العينة للتخلص من المسابر الزائدة التي لم تتحد مع التسلسل المتمم. يتم التحري عن وجود التسلل باستخدام مجهر معين (مشع أو متألق أو مناعي) وذلك بحسب المادة المُعلِّمة للمسبار والتي قد تكون مشعة أو لاصفة أو مناعية. يستخدم التهجين الموضعي في العديد من التطبيقات الطبية التشخيصية كالتحري عن وجود صبغي فلادلفيا. (ar)
- La hibridación in situ (ISH) es una técnica que se utiliza para la localización y la detección de secuencias de ADN y de ARN específicas en las células, cromosomas o tejidos preservados, mediante la formación de una molécula híbrida entre una molécula endógena de ARN o ADN de la célula y una sonda complementaria de ARN o de . La técnica de hibridación in situ se basa en la capacidad que poseen los ácidos nucleicos para hibridarse entre sí, es decir, la existencia de determinada secuencia de ADN o ARN, que resulta complementaria con otra secuencia. Su utilidad reside en la capacidad de poder demostrar mediante la utilización de una sonda (formada por una secuencia de ADN previamente conocida) marcada con un isótopo radiactivo, la presencia de determinada secuencia de ADN o ARN complementaria, en la muestra a estudiar. Cuando una de las dos hebras está marcado, los híbridos reconocidos pueden ser detectados por varios métodos, que pueden ser fluorescente y no fluorescente. La detección in situ permite visualizar de forma directa la ubicación espacial de secuencias específicas, como se observa en la Figura 1, lo cual es esencial para dilucidar la organización y función génica, debido a esto esta técnica es de gran importancia en diversos campos, entre los cuales se encuentra el diagnóstico de rearreglos cromosomales, la detección de infecciones virales y el análisis de la función génica durante el desarrollo embrionario. (es)
- In-situ-Hybridisierung (ISH, auch Hybridisierung in situ) ist eine molekularbiologische Methode zum Nachweis von Nukleinsäuren (RNA oder DNA) in Geweben, einzelnen Zellen oder auf Metaphase-Chromosomen. Dabei wird eine künstlich hergestellte Sonde aus einer Nukleinsäure eingesetzt, die über Basenpaarungen an die nachzuweisende Nukleinsäure bindet (Hybridisierung). Weite Verbreitung haben die Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH) für den Nachweis von DNA oder RNA (RNA-FISH) in Zellkernen, bzw. dem Cytoplasma einzelner Zellen oder auf Metaphase-Chromosomen sowie die Untersuchung der Verteilung von mRNA in ganzen Embryonen, Schnitten oder Geweben mit farbgebenden (chromogenen) Molekülen. Weitere verwendete Bezeichnungen sind genomische In-situ-Hybridisierung (GISH), bei der als Sonde gesamtgenomische DNA eingesetzt wird, sowie chromosomale In-situ-Suppressionshybridisierung (CISS-Hybridisierung), mit der die Markierung von ganzen Chromosomen möglich ist. (de)
- In situ hybridization (ISH) is a type of hybridization that uses a labeled complementary DNA, RNA or modified nucleic acids strand (i.e., probe) to localize a specific DNA or RNA sequence in a portion or section of tissue (in situ) or if the tissue is small enough (e.g., plant seeds, Drosophila embryos), in the entire tissue (whole mount ISH), in cells, and in circulating tumor cells (CTCs). This is distinct from immunohistochemistry, which usually localizes proteins in tissue sections. In situ hybridization is used to reveal the location of specific nucleic acid sequences on chromosomes or in tissues, a crucial step for understanding the organization, regulation, and function of genes. The key techniques currently in use include in situ hybridization to mRNA with oligonucleotide and RNA probes (both radio-labeled and hapten-labeled), analysis with light and electron microscopes, whole mount in situ hybridization, double detection of RNAs and RNA plus protein, and fluorescent in situ hybridization to detect chromosomal sequences. DNA ISH can be used to determine the structure of chromosomes. Fluorescent DNA ISH (FISH) can, for example, be used in medical diagnostics to assess chromosomal integrity. RNA ISH (RNA in situ hybridization) is used to measure and localize RNAs (mRNAs, lncRNAs, and miRNAs) within tissue sections, cells, whole mounts, and circulating tumor cells (CTCs). In situ hybridization was invented by American biologists Mary-Lou Pardue and Joseph G. Gall. (en)
- L'hybridation in situ (HIS) est une technique de laboratoire pour localiser une séquence de nucléotides connue mono-brin (ARN ou ADN) sur une coupe histologique de tissu. Cette technique repose sur la complémentarité des bases nucléiques entre elles (en effet, si l'on place dans un même milieu deux mono-brins inverses complémentaires, ils vont naturellement se rapprocher pour former une hélice). Ainsi, pour pouvoir localiser une molécule d'ADN ou ARN, on doit : 1.
* la dénaturer en la chauffant (la séquence double brin (en hélice) devient mono-brin) ; 2.
* choisir une sonde complémentaire de la séquence cible ; 3.
* marquer la sonde (pour qu'on puisse la repérer et la visualiser). (fr)
- in situ ハイブリダイゼーション（インサイチュー ハイブリダイゼーション、in situ hybridization、ISH）は、組織や細胞において、特定のDNAやmRNAの分布や量を検出する方法。ウイルス感染、腫瘍など診断に用いられるほか、分子生物学でも細胞や組織中の遺伝子発現を研究する上で重要な方法。遺伝子発現を調べる場合に、免疫染色は主にタンパク質の検出を目的とするが、ISH では mRNA の検出を目的とする。 サザンブロッティングやノーザンブロッティングとは異なり、DNA や RNA を抽出せずに、in situ（それらが存在する本来の場所で、すなわち細胞中もしくは組織中で）ハイブリダイゼーションによって検出する。原理はサザンやノーザンと同様で、相補的塩基配列による一本鎖核酸分子間の特異的結合を利用している。検出に用いられる核酸分子をプローブと呼び、従来はDNAやRNAが用いられてきたが、最近ではペプチド核酸（PNA）やLNAといったDNA類似の構造をもつ化合物が用いられる場合がある。プローブの感度と特異度は目的のDNAやmRNAとプローブとの結合力の影響を受ける。通常、ハイブリダイゼーションはプローブのTm値よりやや低めの温度で行うが、温度が低ければ感度は上がるものの特異度が低くなり、逆に温度を高くしTm値に近づけると特異度があがる一方で感度が下がる。そこで、Tm値の高いプローブを作る必要があるが、Tm値を上げる方法としてプローブの長さを長くするもしくは、プローブに用いる核酸分子を変える方法がとられる。DNAプローブよりもRNAプローブの方が同じ配列でTm値の高いプローブを設計出来る。さらに、RNAプローブよりもPNAプローブの方がより感度特異度の高い短いプローブを設計出来る。プローブ分子は，合成時に放射性同位体を取り込ませたり（放射性標識プローブ）、ジゴキシゲニン (digoxigenin, DIG) 、フルオレセインイソチオシアネート（fluorescein isothiocyanate; FITC）などの分子（抗原）を取り込ませたり（非放射性標識プローブ）することで標識する。放射性標識プローブはオートラジオグラフィーによって、DIGやFITCなどによる非放射性標識プローブは抗DIG抗体や抗FITC抗体等を用いて免疫組織化学的に検出する。歴史的には放射性標識プローブの方が先に確立したが、近年では非放射性標識プローブを用いた in situ ハイブリダイゼーションの感度が向上しており、蛍光多重染色も可能であることから、よく用いられるようになってきている。 非放射性標識プローブの検出は、標識物に対する免疫染色そのものであり、蛍光物質で検出する蛍光 in situ ハイブリダイゼーション法やアルカリフォスファターゼを用いNBT/BCIP等で発色する免疫組織化学で検出する方法がある。ペルオキシダーゼで行うことも可能であるが、感度がアルカリフォスファターゼ系に比べ劣るためISHの免疫組織化学的検出法ではアルカリフォスファターゼ系の方が一般的である。 (ja)
- In situ hybridisering (ISH) är en form av hybridisering som använder uppmärkta RNA eller DNA strängar, det vill säga prober, för att detektera en RNA eller DNA sekvens i en vävnad. Motsvarande teknik för att hitta proteiner heter immunohistokemi. Det finns flera olika sorters prober att välja mellan. Vilken man väljer beror på storleken på det man vill detektera, vad man vill mäta och vilken känslighet man är ute efter. Exempel på prober kan vara cDNA kloner, kosmid kloner och . Proberna märks upp med olika etiketter. Exempel på detta kan vara biotin och . Proberna kan detekteras på en rad olika sätt. ISH kan användas för detektering av genetiska sjukdomar och för att upptäcka förändringar i kromosomerna. (sv)
- A hibridação in situ, por vezes chamada de hibridização in situ (do inglês: "in situ hybridization") é uma técnica laboratorial que usa sondas de DNA, RNA que localizam outras sequências específicas de DNA ou RNA de uma parte ou trecho de tecido (in situ). Se o tecido for pequeno o suficiente (por exemplo, sementes de plantas, embriões Drosophila), pode ser aplicada ao tecido inteiro. É diferente da imuno-histoquímica, que geralmente localiza proteínas em seções de tecido. A hibridação in situ é uma técnica poderosa para a identificação específica de tipos de mRNA dentro de células individuais em trechos de tecido, fornecendo esclarecimentos sobre os processos fisiológicos e patogênese de doenças. No entanto, a hibridização in situ exige medidas precisas de otimização para cada tecido examinado e, para cada sonda utilizada. A fim de preservar o mRNA alvo dentro dos tecidos, muitas vezes é necessário que fixadores reticulados (como o formaldeído) sejam usados. A hibridação in situ é utilizado para revelar a localização específica de sequências de ácidos nucleicos nos cromossomos ou em tecidos, um passo crucial para a compreensão da organização, regulação e função dos genes. As principais técnicas atualmente em uso incluem: hibridização in situ para o mRNA com oligonucleotídeos e sondas de RNA (ambos de rádio-marcadores e hapteno-marcadores); análise microscópios de luz e eletrônicos; toda a montagem da hibridização in situ; dupla detecção de RNAs e RNA+proteínas; e hibridização fluorescente in situ para detectar sequências cromossômicas. DNA ISH pode ser usado para determinar a estrutura dos cromossomos. DNA Fluorescente ISH (FISH) pode, por exemplo, ser utilizado em diagnósticos médicos para avaliar a integridade cromossômica. RNA ISH (RNA in situ hybridization) é usado para medir e localizar as RNAs (mRNAs, lncRNAs, e miRNAs) dentro de trechos de tecido, células, e circulação de células tumorais (CTCs). Hibridização in situ foi inventado por Joseph G. Fel e Mary-Lou Pardue. (pt)
- 原位杂交化学技术（英語：In situ hybridization，缩写：ISH），简称原位杂交，是核酸杂交技术的一种方式。其使用标记的互补DNA，RNA或修饰的核酸链（即探针）定位组织的一部分或部分中的特定DNA或RNA序列（即原位）。如果组织足够小（例如植物种子，果蝇胚胎），也可以定位整个组织，细胞和循环肿瘤细胞。这与免疫组织化学不同，免疫组织化学通常是定位组织切片中的蛋白质。 原位杂交用于揭示特定核酸序列在染色体或组织中的位置，这是理解基因的组织，调节和功能的关键步骤。 目前使用的关键技术包括：用寡核苷酸和RNA探针（放射性标记和半抗原标记）与 mRNA 原位杂交；用光学和电子显微镜进行分析； 整体原位杂交;和荧光原位杂交检测染色体序列等。 原位杂交技术由Mary-Lou Pardue和约瑟夫·G·加尔发明。 (zh)
|
| rdfs:comment
|
- 原位杂交化学技术（英語：In situ hybridization，缩写：ISH），简称原位杂交，是核酸杂交技术的一种方式。其使用标记的互补DNA，RNA或修饰的核酸链（即探针）定位组织的一部分或部分中的特定DNA或RNA序列（即原位）。如果组织足够小（例如植物种子，果蝇胚胎），也可以定位整个组织，细胞和循环肿瘤细胞。这与免疫组织化学不同，免疫组织化学通常是定位组织切片中的蛋白质。 原位杂交用于揭示特定核酸序列在染色体或组织中的位置，这是理解基因的组织，调节和功能的关键步骤。 目前使用的关键技术包括：用寡核苷酸和RNA探针（放射性标记和半抗原标记）与 mRNA 原位杂交；用光学和电子显微镜进行分析； 整体原位杂交;和荧光原位杂交检测染色体序列等。 原位杂交技术由Mary-Lou Pardue和约瑟夫·G·加尔发明。 (zh)
- التهجين الموضعي (بالإنجليزية: In situ Hybridization) هي وتقنية وراثية خلوية تستخدم للتحري عن تسلسل معين من الدنا أو الرنا في نسيج ما ولهذا السبب سميت بالتهجين الموضعي. يتم تحديد مكان هذا التسلسل باستخدام مسبار متمم للتسلسل المراد تحديد مكانه. (ar)
- In-situ-Hybridisierung (ISH, auch Hybridisierung in situ) ist eine molekularbiologische Methode zum Nachweis von Nukleinsäuren (RNA oder DNA) in Geweben, einzelnen Zellen oder auf Metaphase-Chromosomen. Dabei wird eine künstlich hergestellte Sonde aus einer Nukleinsäure eingesetzt, die über Basenpaarungen an die nachzuweisende Nukleinsäure bindet (Hybridisierung). (de)
- In situ hybridization (ISH) is a type of hybridization that uses a labeled complementary DNA, RNA or modified nucleic acids strand (i.e., probe) to localize a specific DNA or RNA sequence in a portion or section of tissue (in situ) or if the tissue is small enough (e.g., plant seeds, Drosophila embryos), in the entire tissue (whole mount ISH), in cells, and in circulating tumor cells (CTCs). This is distinct from immunohistochemistry, which usually localizes proteins in tissue sections. (en)
- La hibridación in situ (ISH) es una técnica que se utiliza para la localización y la detección de secuencias de ADN y de ARN específicas en las células, cromosomas o tejidos preservados, mediante la formación de una molécula híbrida entre una molécula endógena de ARN o ADN de la célula y una sonda complementaria de ARN o de . La técnica de hibridación in situ se basa en la capacidad que poseen los ácidos nucleicos para hibridarse entre sí, es decir, la existencia de determinada secuencia de ADN o ARN, que resulta complementaria con otra secuencia. Su utilidad reside en la capacidad de poder demostrar mediante la utilización de una sonda (formada por una secuencia de ADN previamente conocida) marcada con un isótopo radiactivo, la presencia de determinada secuencia de ADN o ARN complement (es)
- L'hybridation in situ (HIS) est une technique de laboratoire pour localiser une séquence de nucléotides connue mono-brin (ARN ou ADN) sur une coupe histologique de tissu. Cette technique repose sur la complémentarité des bases nucléiques entre elles (en effet, si l'on place dans un même milieu deux mono-brins inverses complémentaires, ils vont naturellement se rapprocher pour former une hélice). Ainsi, pour pouvoir localiser une molécule d'ADN ou ARN, on doit : (fr)
- in situ ハイブリダイゼーション（インサイチュー ハイブリダイゼーション、in situ hybridization、ISH）は、組織や細胞において、特定のDNAやmRNAの分布や量を検出する方法。ウイルス感染、腫瘍など診断に用いられるほか、分子生物学でも細胞や組織中の遺伝子発現を研究する上で重要な方法。遺伝子発現を調べる場合に、免疫染色は主にタンパク質の検出を目的とするが、ISH では mRNA の検出を目的とする。 非放射性標識プローブの検出は、標識物に対する免疫染色そのものであり、蛍光物質で検出する蛍光 in situ ハイブリダイゼーション法やアルカリフォスファターゼを用いNBT/BCIP等で発色する免疫組織化学で検出する方法がある。ペルオキシダーゼで行うことも可能であるが、感度がアルカリフォスファターゼ系に比べ劣るためISHの免疫組織化学的検出法ではアルカリフォスファターゼ系の方が一般的である。 (ja)
- In situ hybridisering (ISH) är en form av hybridisering som använder uppmärkta RNA eller DNA strängar, det vill säga prober, för att detektera en RNA eller DNA sekvens i en vävnad. Motsvarande teknik för att hitta proteiner heter immunohistokemi. ISH kan användas för detektering av genetiska sjukdomar och för att upptäcka förändringar i kromosomerna. (sv)
- A hibridação in situ, por vezes chamada de hibridização in situ (do inglês: "in situ hybridization") é uma técnica laboratorial que usa sondas de DNA, RNA que localizam outras sequências específicas de DNA ou RNA de uma parte ou trecho de tecido (in situ). Se o tecido for pequeno o suficiente (por exemplo, sementes de plantas, embriões Drosophila), pode ser aplicada ao tecido inteiro. É diferente da imuno-histoquímica, que geralmente localiza proteínas em seções de tecido. (pt)
|
