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- Die Plattenauszählung (synonym Kolonienzählung, surface-viable count, plate count, Miles-und-Misra-Methode) ist eine mikrobiologische Methode zur Bestimmung der Anzahl an koloniebildenden Einheiten und somit der Lebendzellzahl von Mikroorganismen in einer Probe. (de)
- El método de Miles y Misra o conteo de microorganismos viables en superficie es una técnica utilizada para calcular el número de unidades formadoras de una colonia en una suspensión bacteriana. Fue descubierto por Miles y Misra en 1938. El procedimiento de la técnica es el siguiente:
* Se preparan una serie progresiva de diluciones en serie de la suspensión bacteriana original, tantas como sean necesarias.
* Los materiales necesarios son una micropipeta correctamente calibrada que pueda surtir gotas de 0.02ml y 6 placas de agar nutritivo. Estas placas se dividen en sectores numerados.
* La suspensión o dilución se coloca en forma de gotas (0.02ml) desde una altura de 2,5 cm; ésta se dispersará aproximadamente en un área de 1.5 a 2.0 cm de diámetro.
* Cada una de las 6 placas tendrá una gota de cada dilución en el sector correspondiente (numerado)
* Periodo de incubación: 18-24 horas. Posteriormente, se observa su crecimiento.
* Los sectores en los que hay más de 20 colonias no muestran confluencia y son utilizados para realizar los conteos de viabilidad.
* El número de bacterias viable por 0.02ml de una dilución se obtiene calculando la media de los contajes para cada dilución en las 6 placas. (es)
- The Miles and Misra Method (or surface viable count) is a technique used in Microbiology to determine the number of colony forming units in a bacterial suspension or homogenate. The technique was first described in 1938 by Miles, Misra and Irwin who at the time were working at the LSHTM. The Miles and Misra method has been shown to be precise. Materials
* A calibrated dropping pipette, or automatic pipette, delivering drops of 20μl.
* Petri dishes containing nutrient agar or other appropriate medium.
* Phosphate Buffered Saline (PBS) or other appropriate diluent.
* Bacterial suspension or homogenate. Method
* The inoculum / suspension is serially diluted by adding 1x of suspension to 9x of diluent. When the quantity of bacteria is unknown, dilutions should be made to at least 10−8.
* Three plates are needed for each dilution series, for statistical reasons an average of at least 3 counts are needed.
* The surface of the plates need to be sufficiently dry to allow a 20μl drop to be absorbed in 15–20 minutes.
* Plates are divided into equal sectors (it is possible to use up to 8 per plate). The sectors are labelled with the dilutions.
* In each sector, 1 x 20 μl of the appropriate dilution is dropped onto the surface of the agar and the drop allowed to spread naturally. In the original description of the method a drop from a height of 2.5 cm spread over an area of 1.5-2.0 cm. It is important to avoid touching the surface of the agar with the pipette.
* The plates are left upright on the bench to dry before inversion and incubation at 37 °C for 18 – 24 hours (or appropriate incubation conditions considering the organism and agar used).
* Each sector is observed for growth, high concentrations will give a confluent growth over the area of the drop, or a large number of small/merged colonies. Colonies are counted in the sector where the highest number of full-size discrete colonies can be seen (usually sectors containing between 2-20 colonies are counted).
* The following equation is used to calculate the number of colony forming units (CFU) per ml from the original aliquot / sample:CFU per ml = Average number of colonies for a dilution x 50 x dilution factor. Advantages
* Faster than other methods.
* Produce less bacterial contamination of the working surface. (en)
- ミスラ法は、の簡易測定法。常法では菌液を寒天培地になりなりなりして培養するが、本法では菌液を寒天平板に滴下・浸透させるのみで培養、生菌数を測定する。イギリスのマイルスとミスラ(1938年、733頁)が考案した。 (ja)
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- Die Plattenauszählung (synonym Kolonienzählung, surface-viable count, plate count, Miles-und-Misra-Methode) ist eine mikrobiologische Methode zur Bestimmung der Anzahl an koloniebildenden Einheiten und somit der Lebendzellzahl von Mikroorganismen in einer Probe. (de)
- ミスラ法は、の簡易測定法。常法では菌液を寒天培地になりなりなりして培養するが、本法では菌液を寒天平板に滴下・浸透させるのみで培養、生菌数を測定する。イギリスのマイルスとミスラ(1938年、733頁)が考案した。 (ja)
- El método de Miles y Misra o conteo de microorganismos viables en superficie es una técnica utilizada para calcular el número de unidades formadoras de una colonia en una suspensión bacteriana. Fue descubierto por Miles y Misra en 1938. El procedimiento de la técnica es el siguiente: (es)
- The Miles and Misra Method (or surface viable count) is a technique used in Microbiology to determine the number of colony forming units in a bacterial suspension or homogenate. The technique was first described in 1938 by Miles, Misra and Irwin who at the time were working at the LSHTM. The Miles and Misra method has been shown to be precise. Materials Method Advantages
* Faster than other methods.
* Produce less bacterial contamination of the working surface. (en)
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- Plattenauszählung (de)
- Método de Miles y Misra (es)
- ミスラ法 (ja)
- Miles and Misra method (en)
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