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- فحص التهجين الثنائي أو تحري الهجينين أو نظام الهجينين الخميري (بالإنجليزية: Two-hybrid screening) (Y2H)هي تقنية تُستخدم في علم الأحياء الجزيئي لاكتشاف تآثرات البروتين-بروتين وتآثراث بروتين-دنا بالتحري عن تآثرات فيزيائية (كالارتباط مثلا) بين بروتينين أو بروتين وجزيئة دنا. تعتبر تقنية التهجين الثنائي . (ar)
- La tècnica del doble híbrid en llevat és una tècnica de biologia molecular utilitzada per trobar proteïnes que interaccionen mútuament. La tècnica consisteix en l'activació d'un gen reporter per l'acció d'un factor de transcripció que s'enllaça a la seqüència reguladora "UAS" (en anglès "Upstream Activating Sequence") localitzada en el promotor més a dalt del lloc d'inici de la transcripció. El principi de la tècnica és el següent: el factor de transcripció és separat en dos fragments, un que reconeix UAS i l'altre que promou l'activació de la maquinària de transcripció. Cada fragment és introduït a les proteïnes la interacció de les quals es vol analitzar, utilitzant tècniques d'enginyeria genètica. Si les proteïnes formen un complex entre si, els dos fragments del factor de transcripció es trobaran i el gen reporter serà transcrit. (ca)
- Dvouhybridový systém (příp. dvojhybridní systém) je molekulárně biologická metoda umožňující studium . Systém využívá jistý uměle sestavený , který je vložen do hostitelských buněk (nejčastěji kvasinky či bakterie) a po expresi vložených genů se dá posoudit, zda spolu dva proteiny interagují (jsou v buňce v těsném kontaktu). Nejčastější variantou této metody je kvasinkový dvouhybridový systém (Y2H). Jeho objev představuje velký milník ve výzkumu vzájemných vztahů mezi bílkovinami. (cs)
- El Sistema de dos híbridos o técnica del doble híbrido en levadura es una técnica de biología molecular usada para detectar interacción entre dos proteínas. A menudo se denota por Y2H (del inglés Yeast Two Hybrid). La técnica consiste en la activación de un gen reportero o más por la acción de un factor de transcripción sobre la secuencia regulatoria "UAS" (en inglés, Upstream activating sequence) localizada upstream del promotor. El principio de la técnica es el siguiente, el factor de transcripción es separado en dos fragmentos, uno que reconoce UAS y el otro que promueve la activación de la maquinaria de transcripción. Cada fragmento es fusionado a una de las proteínas cuya interacción se desea analizar, usando técnicas de ingeniería genética. Si las proteínas forman un complejo entre sí, los dos fragmentos del factor de transcripción se encontrarán y el gen reportero será transcrito. (es)
- La technique de double hybride est une technique de biologie moléculaire permettant de détecter une interaction physique entre deux protéines. La technique est la suivante : on utilise une protéine test (telle ) dont une des extrémités peut se fixer à une séquence activatrice, et l'autre activer la transcription du gène rapporteur (comme lacZ) mis sous contrôle de cette séquence. Par génie génétique, on synthétise ensuite deux protéines hybrides : une constituée de l'une des extrémités de la protéine test fusionnée avec la première protéine d'intérêt, l'autre formée de l'autre extrémité fusionnée à l'autre protéine d'intérêt. Si les deux protéines interagissent physiquement, ces deux hybrides vont se rapprocher et permettre la transcription du gène rapporteur. Cette technique peut cependant échouer, à cause des manipulations faites sur les protéines, et nécessite de nombreux contrôles. En outre, on teste systématiquement la réciprocité, c'est-à-dire que l'on inverse les fusions des deux protéines d'intérêt avec les deux extrémités de la protéine test. On vérifie alors que l'on obtient bien le même résultat. (fr)
- Two-hybrid screening (originally known as yeast two-hybrid system or Y2H) is a molecular biology technique used to discover protein–protein interactions (PPIs) and protein–DNA interactions by testing for physical interactions (such as binding) between two proteins or a single protein and a DNA molecule, respectively. The premise behind the test is the activation of downstream reporter gene(s) by the binding of a transcription factor onto an upstream activating sequence (UAS). For two-hybrid screening, the transcription factor is split into two separate fragments, called the DNA-binding domain (DBD or often also abbreviated as BD) and activating domain (AD). The BD is the domain responsible for binding to the UAS and the AD is the domain responsible for the activation of transcription. The Y2H is thus a protein-fragment complementation assay. (en)
- ツーハイブリッド法（ツーハイブリッドほう、two-hybrid法）とはタンパク質間相互作用やタンパク質-DNA間相互作用を調べる手法の一つ。出芽酵母 Saccharomyces cerevisiae を用いた yeast two-hybrid (Y2H) system が最初に構築された。生物種を酵母から大腸菌にかえたり、GAL4の代わりにLexAを用いる、Rasシグナル経路を用いる、など様々な改変型手法がある。 原法では転写活性化因子であるGAL4タンパク質のDNA結合ドメインとアクティベータドメインが分離可能であることを利用している。GAL4のDNA 結合ドメイン (DBD) はUASG (Upstream Activatin Sequences for galactose) と呼ばれる塩基配列に結合するという機能を持つ。一方、酸性アミノ酸に富んだカルボキシル末端のアクティベータドメイン (AD) は転写因子の会合を促進し、転写を促進する機能を持つ。ここで、GAL4DBDと任意のタンパク質Aを融合タンパク質として発現させ、同時に同じ細胞内でアクティベータドメインとタンパク質Bを融合タンパク質として発現させる。タンパク質Aとタンパク質Bが相互作用しないならDNA結合ドメインと転写活性化ドメインは近接せず、タンパク質Aとタンパク質Bが相互作用をするなら、GAL4 DNA結合ドメインとアクティベータドメインが近接することになる。後者のとき、UASGを上流にもつレポーター遺伝子が酵母細胞に導入されていれば、その発現量が上昇し、これによってタンパク質Aとタンパク質Bの相互作用の有無あるいは強度を検定できる。このようにして二種のタンパク質間の相互作用や、さらには相互作用に関わるドメインの推測、また重要なアミノ酸の検討などを行うことができる。魚釣りに見立ててGAL4DBD-融合タンパク質をbait（釣り餌）、AD-融合タンパク質をprey（餌食）と呼ぶ。 in vitro（試験管内）で純粋に2種のタンパク質のみ存在する条件化で相互作用を検討する場合に比べ、真核生物の細胞を用いることはより生体内に近い条件と考えられる。しかし擬陽性も多く見られ、免疫沈降法やなど他の手法も用いて検討する必要がある。一方で、一度に多数の検定を行うことができるため、スクリーニングに用いられることが多い。 Two hybridスクリーニングでは、タンパク質Bのソースとして発現ライブラリーを用いる。つまり興味ある遺伝子産物をAとし、その相方を求めてライブラリーをスクリーニングし新規のタンパク質を探索することが広く行われた。さらに規模を拡大して、ある生物種におけるある一群のタンパク質あるいは全タンパク質をAとし、タンパク質間相互作用のネットワークを描き出すような試みも成されている。このような作業はポストゲノムシークエンスと呼ばれる20世紀末から21世紀前半にかけての時代に、プロテオーム解析などと呼ばれることとなる。 (ja)
- 효모단백질잡종법(Yeast two-hybrid system)은 Y2H, two-hybrid screening으로 불리기도 하며, 결합과 같은 물리적인 상호작용을 검사하여 단백질-단백질 상호작용 또는 단백질-DNA 상호작용을 발견할 때 쓰이는 분자생물학적인 기술이다. 이 검사의 원리는 상류활성화부위(upstream activating sequence, UAS)에 전사인자의 결합에 의한 하류보고유전자(downstream reporter gene)의 활성이다. Two-hybrid screening을 위해, 전사인자는 결합도메인(binding domain, BD)과 활성도메인(activating domain, AD)로 불리는 두 조각으로 나뉜다. 결합도메인은 상류활성화부위에 결합하는 도메인이고, 활성도메인은 전사활성을 하는 도메인이다. (ko)
- Drożdżowy system dwuhybrydowy – metoda identyfikacji oddziaływań pomiędzy białkami. Istota działania tej techniki opiera się na tym, iż czynniki transkrypcyjne zbudowane są z dwóch niezależnych funkcjonalnie domen: wiązania DNA (ang. BD – binding domain) i domenę aktywatorową (ang. AD- activator domain) W drożdżowym systemie dwuhybrydowym domena wiązania DNA (BD) czynnika transkrypcyjnego GAL4 związana jest z białkiem "przynętą" (ang. bait), natomiast domena aktywatorowa (AD) GAL4 związana jest z białkiem "ofiarą" (ang. pray). Komórka syntezująca oba białka fuzyjne charakteryzuje się ekspresją genów reporterowych pod warunkiem, że badane białka (przynęta i ofiara) oddziałują ze sobą. (pl)
- O sistema de duplo híbrido (em inglês: Two-hybrid screening) é uma técnica de biologia molecular usada na identificação e descoberta de interações proteína-proteína ou proteína-ADN através do teste de interações físicas entre duas proteínas ou entre uma proteína e uma molécula de ADN, respetivamente. (pt)
- Двугибридный анализ — молекулярно-биологический метод, позволяющий с высокой точностью детектировать белок-белковые и ДНК-белковые взаимодействия в условиях in vivo. В его основе лежит использование факторов транскрипции, состоящих из физически и функционально разделимых доменов: ДНК-связывающего (binding domain, BD) и активаторного домена (activation domain, AD). Физическое взаимодействие двух рекомбинантных белков инициирует слияние «сшитых» с ними транскрипционных доменов, активируя экспрессию репортерных генов. (ru)
- 酵母菌雙雜合系統，英文為Yeast two-hybrid system，亦簡稱Two-hybrid screening，是一種研究蛋白質交互作用或蛋白質和DNA交互作用的實驗技術。 此系統的基本原理是報導基因上游的啟動區域與轉錄因子結合後，使下游的報導基因表現。在酵母菌雙雜合系統中將轉錄因子設計為結合區(Binding domain, BD)和活化區(Active domain, AD)，結合區可與基因上游的啟動區域結合，活化區負責活動下游報導基因開始轉錄。 (zh)
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- فحص التهجين الثنائي أو تحري الهجينين أو نظام الهجينين الخميري (بالإنجليزية: Two-hybrid screening) (Y2H)هي تقنية تُستخدم في علم الأحياء الجزيئي لاكتشاف تآثرات البروتين-بروتين وتآثراث بروتين-دنا بالتحري عن تآثرات فيزيائية (كالارتباط مثلا) بين بروتينين أو بروتين وجزيئة دنا. تعتبر تقنية التهجين الثنائي . (ar)
- Dvouhybridový systém (příp. dvojhybridní systém) je molekulárně biologická metoda umožňující studium . Systém využívá jistý uměle sestavený , který je vložen do hostitelských buněk (nejčastěji kvasinky či bakterie) a po expresi vložených genů se dá posoudit, zda spolu dva proteiny interagují (jsou v buňce v těsném kontaktu). Nejčastější variantou této metody je kvasinkový dvouhybridový systém (Y2H). Jeho objev představuje velký milník ve výzkumu vzájemných vztahů mezi bílkovinami. (cs)
- 효모단백질잡종법(Yeast two-hybrid system)은 Y2H, two-hybrid screening으로 불리기도 하며, 결합과 같은 물리적인 상호작용을 검사하여 단백질-단백질 상호작용 또는 단백질-DNA 상호작용을 발견할 때 쓰이는 분자생물학적인 기술이다. 이 검사의 원리는 상류활성화부위(upstream activating sequence, UAS)에 전사인자의 결합에 의한 하류보고유전자(downstream reporter gene)의 활성이다. Two-hybrid screening을 위해, 전사인자는 결합도메인(binding domain, BD)과 활성도메인(activating domain, AD)로 불리는 두 조각으로 나뉜다. 결합도메인은 상류활성화부위에 결합하는 도메인이고, 활성도메인은 전사활성을 하는 도메인이다. (ko)
- O sistema de duplo híbrido (em inglês: Two-hybrid screening) é uma técnica de biologia molecular usada na identificação e descoberta de interações proteína-proteína ou proteína-ADN através do teste de interações físicas entre duas proteínas ou entre uma proteína e uma molécula de ADN, respetivamente. (pt)
- Двугибридный анализ — молекулярно-биологический метод, позволяющий с высокой точностью детектировать белок-белковые и ДНК-белковые взаимодействия в условиях in vivo. В его основе лежит использование факторов транскрипции, состоящих из физически и функционально разделимых доменов: ДНК-связывающего (binding domain, BD) и активаторного домена (activation domain, AD). Физическое взаимодействие двух рекомбинантных белков инициирует слияние «сшитых» с ними транскрипционных доменов, активируя экспрессию репортерных генов. (ru)
- 酵母菌雙雜合系統，英文為Yeast two-hybrid system，亦簡稱Two-hybrid screening，是一種研究蛋白質交互作用或蛋白質和DNA交互作用的實驗技術。 此系統的基本原理是報導基因上游的啟動區域與轉錄因子結合後，使下游的報導基因表現。在酵母菌雙雜合系統中將轉錄因子設計為結合區(Binding domain, BD)和活化區(Active domain, AD)，結合區可與基因上游的啟動區域結合，活化區負責活動下游報導基因開始轉錄。 (zh)
- La tècnica del doble híbrid en llevat és una tècnica de biologia molecular utilitzada per trobar proteïnes que interaccionen mútuament. La tècnica consisteix en l'activació d'un gen reporter per l'acció d'un factor de transcripció que s'enllaça a la seqüència reguladora "UAS" (en anglès "Upstream Activating Sequence") localitzada en el promotor més a dalt del lloc d'inici de la transcripció. (ca)
- El Sistema de dos híbridos o técnica del doble híbrido en levadura es una técnica de biología molecular usada para detectar interacción entre dos proteínas. A menudo se denota por Y2H (del inglés Yeast Two Hybrid). La técnica consiste en la activación de un gen reportero o más por la acción de un factor de transcripción sobre la secuencia regulatoria "UAS" (en inglés, Upstream activating sequence) localizada upstream del promotor. (es)
- La technique de double hybride est une technique de biologie moléculaire permettant de détecter une interaction physique entre deux protéines. La technique est la suivante : on utilise une protéine test (telle ) dont une des extrémités peut se fixer à une séquence activatrice, et l'autre activer la transcription du gène rapporteur (comme lacZ) mis sous contrôle de cette séquence. Par génie génétique, on synthétise ensuite deux protéines hybrides : une constituée de l'une des extrémités de la protéine test fusionnée avec la première protéine d'intérêt, l'autre formée de l'autre extrémité fusionnée à l'autre protéine d'intérêt. Si les deux protéines interagissent physiquement, ces deux hybrides vont se rapprocher et permettre la transcription du gène rapporteur. (fr)
- Two-hybrid screening (originally known as yeast two-hybrid system or Y2H) is a molecular biology technique used to discover protein–protein interactions (PPIs) and protein–DNA interactions by testing for physical interactions (such as binding) between two proteins or a single protein and a DNA molecule, respectively. (en)
- ツーハイブリッド法（ツーハイブリッドほう、two-hybrid法）とはタンパク質間相互作用やタンパク質-DNA間相互作用を調べる手法の一つ。出芽酵母 Saccharomyces cerevisiae を用いた yeast two-hybrid (Y2H) system が最初に構築された。生物種を酵母から大腸菌にかえたり、GAL4の代わりにLexAを用いる、Rasシグナル経路を用いる、など様々な改変型手法がある。 in vitro（試験管内）で純粋に2種のタンパク質のみ存在する条件化で相互作用を検討する場合に比べ、真核生物の細胞を用いることはより生体内に近い条件と考えられる。しかし擬陽性も多く見られ、免疫沈降法やなど他の手法も用いて検討する必要がある。一方で、一度に多数の検定を行うことができるため、スクリーニングに用いられることが多い。 (ja)
- Drożdżowy system dwuhybrydowy – metoda identyfikacji oddziaływań pomiędzy białkami. Istota działania tej techniki opiera się na tym, iż czynniki transkrypcyjne zbudowane są z dwóch niezależnych funkcjonalnie domen: wiązania DNA (ang. BD – binding domain) i domenę aktywatorową (ang. AD- activator domain) (pl)
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