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- Molecular cloning refers to the procedure of isolating a defined DNA sequence and obtaining multiple copies of it in vivo. Cloning is frequently employed to amplify DNA fragments containing genes, but it can be used to amplify any DNA sequence such as promoters, non-coding sequences, chemically synthesised oligonucleotides and randomly fragmented DNA. Cloning is used in a wide array of biological experiments and technological applications such as large scale protein production.
- Klonierung (oder Klonieren, engl. molecular cloning) ist in der Molekularbiologie der Überbegriff für mehrere Methoden. Das Ziel dieser Methoden ist die Herstellung und Vervielfältigung eines DNA-Moleküls. Klonen bezeichnet hingegen das Herstellen genetisch identischer Organismen. Bei der Klonierung wird ein gewünschtes DNA-Fragment in einen Vektor integriert. Das Ziel einer Klonierung ist, ein DNA-Fragment zu vermehren, um seine Eigenschaften zu untersuchen. Durch Isolation der gesamten DNA kann ein Vielfaches der anfangs eingesetzten DNA-Menge gewonnen werden, was kostengünstig, präzise und in großer Zahl (i.G. zu in vitro-Verfahren wie PCR) geschieht. Alternativ können die Zellen ein Genprodukt wie Protein rekombinant exprimieren (beispielsweise bei einer Proteinüberexpression). Solche Proteine spielen eine Rolle für therapeutische Zwecke in der Lebensmitteltechnologie in der Landwirtschaft Für die Klonierung werden verschiedende Organismen als Wirt genutzt. Bekannte Beispiele sind Bakterienzellen wie z. B. das Bakterium Escherichia coli, einzellige Algen oder Pilze (Biotechnologie). Die Wirtszellen vermehren sich dabei durch Zellteilung. Das Resultat ist eine Population von Zellen, die alle einen Klon des gewünschten DNA-Fragments enthalten. Weiterhin kann die Klonierung auch dazu verwendet werden, ein oder mehrere Gene auf fremde Organismen zu übertragen, Stoffwechselprozesse zu verbessern oder Resistenzen zu verleihen (bei Tieren und Pflanzen), was zur Genmanipulation führt.
- Clonaggio, con riferimento a frammenti di DNA, è un termine che descrive una serie di tecniche con le quali è possibile ottenere più copie di una determinata sequenza nucleotidica, non necessariamente di natura genica. Esistono essenzialmente due tecnologie di clonaggio: la prima, anche in ordine temporale (risale agli anni '70), utilizza per il clonaggio del DNA gli enzimi di restrizione e vettori di clonaggio. Brevemente, il frammento d'interesse deve essere isolato con enzimi di restrizione e quindi inserito in un vettore mediante reazione di ligasi. Il vettore così ottenuto viene inserito nella cellula ospite, che viene coltivata in terreni selettivi. Un secondo tipo di clonaggio, oggi ampiamente più usato e che ha rivoluzionato la biologia molecolare, e' divenuto possibile nel 1985 con la messa a punto della reazione a catena della polimerasi o PCR. In breve, questa tecnica sfrutta la reazione catalizzata in vivo dall'enzima DNA polimerasi, durante la duplicazione semiconservativa del DNA, per realizzare clonaggi in vitro di qualsiasi frammento, di opportuna lunghezza, localizzato tra due brevi sequenze nucleotidiche dette primers.
- Moleküler klonlama, Gen çoğaltımı veya Gen klonlaması, rekombinant DNA moleküllerinin uygun bir konak hücreye sokularak orada çoğaltılması işlemine verilen addır. Rekombinant DNA teknolojisi genelde, bir organizmadan elde edilen ve içinde istenilen geni taşıyan DNA parçalarının, taşıyıcı özellikte bir DNA molekülüne bağlanarak rekombinant DNA oluşturulması, rekombinant DNA moleküllerinin uygun bir konak hücreye sokularak orada çoğaltılmasını kapsayan bir süreci izlemektedir. Bu sürecin tanımlanmış bir DNA dizisinin yalıtımı (izolasyonu) ve daha sonrasında bunun birçok kopyasını in vivo koşullarda üretme aşamalarını kapsayan kısmı ise gen klonlamasıdır. Klonlama, çoğunlukla gen içeren DNA parçalarının kuvvetlendirilmesi için kullanılsa da, DNA'nın promotorlar, kodlanmamış diziler, kimyasal sentezlenmiş oligonükleotidler gibi kısımlarını ve nadiren kırılmış DNA'yı kuvvetlendirmek için de kullanılabilir. Bu süreçte konak hücreler çoğladıkça rekombinant DNA molekülleri döllere geçerler ve yavru hücrelerde de kopya sayılarını arttırırlar. Çok sayıda hücre bölünmesini takiben oluşan bir klonda hücrelerin her birinde istenilen geni taşıyan cDNA moleküllerinin bir ya da daha fazla sayıda kopyası bulunur. Buna göre, gen klonlaması (ya da DNA klonlaması) tek bir genden kökenlenen ve hepsi birbirinin ayn olan bir DNA populasyonu elde etmektedir. Bu teknolojiyle ayrıca çoğu kez klonlanmış bir genin kendisi için yeni konakta ifade edimin (ekspresyonun) sağlanmasıyla ürünün eldesi de amaçlanmaktadır. Moleküler klonlama, biyoloji deneylerinin ve yüksek oranda protein üretimi gibi teknolojik uygulamaların çoğunda yarar sağlamaktadır.
- Молекулярне клонування — процедура ізоляції певної послідовності ДНК і отримання багаторьох копій цієї послідовності in vivo. Клонування часто використовується для ампліфікації фрагмента ДНК, що містить гени, але може використовуватися і для ампліфікації будь-якої послідовності ДНК, наприклад промоторів, некодуючих послідовностей і випадкових фрагментів ДНК. Молекулярне клонування широко використовується в багатьох біологічних експериментах та находить багато практичних застосувань, наприклад виробництво білків у значній кількості. Молекулярне клонування пов'язане з процедурою субклонування, тобто переміщення фрагмента ДНК (зазвичай гену) з одного вектора до іншого. Іноді термін неправильно використовується, посилаючись на процес позиційного клонування, тобто визначення хромосомного розташування гена, пов'язаного із певним фенотипом. На практиці, локалізація гена на хромосомі або в регіоні геному не обов'язково надає можливість ізолювати його послідовність.
- 分子選殖(英語:Molecular cloning,又譯分子克隆或分子群殖)是指分離一個已知DNA序列,並以in vivo(活體內)方式獲得許多複製品的過程。这一复制过程经常被用于增加並獲取DNA片段中的基因,但也可用来增加某些任意的DNA序列,如啟動子、非編碼序列、化學合成的寡核苷酸或是隨機的DNA片斷。
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- Molecular cloning refers to the procedure of isolating a defined DNA sequence and obtaining multiple copies of it in vivo. Cloning is frequently employed to amplify DNA fragments containing genes, but it can be used to amplify any DNA sequence such as promoters, non-coding sequences, chemically synthesised oligonucleotides and randomly fragmented DNA. Cloning is used in a wide array of biological experiments and technological applications such as large scale protein production.
- Klonierung (oder Klonieren, engl. molecular cloning) ist in der Molekularbiologie der Überbegriff für mehrere Methoden. Das Ziel dieser Methoden ist die Herstellung und Vervielfältigung eines DNA-Moleküls. Klonen bezeichnet hingegen das Herstellen genetisch identischer Organismen. Bei der Klonierung wird ein gewünschtes DNA-Fragment in einen Vektor integriert. Das Ziel einer Klonierung ist, ein DNA-Fragment zu vermehren, um seine Eigenschaften zu untersuchen.
- Clonaggio, con riferimento a frammenti di DNA, è un termine che descrive una serie di tecniche con le quali è possibile ottenere più copie di una determinata sequenza nucleotidica, non necessariamente di natura genica. Esistono essenzialmente due tecnologie di clonaggio: la prima, anche in ordine temporale (risale agli anni '70), utilizza per il clonaggio del DNA gli enzimi di restrizione e vettori di clonaggio.
- Moleküler klonlama, Gen çoğaltımı veya Gen klonlaması, rekombinant DNA moleküllerinin uygun bir konak hücreye sokularak orada çoğaltılması işlemine verilen addır.
- Молекулярне клонування — процедура ізоляції певної послідовності ДНК і отримання багаторьох копій цієї послідовності in vivo.
- 分子選殖(英語:Molecular cloning,又譯分子克隆或分子群殖)是指分離一個已知DNA序列,並以in vivo(活體內)方式獲得許多複製品的過程。这一复制过程经常被用于增加並獲取DNA片段中的基因,但也可用来增加某些任意的DNA序列,如啟動子、非編碼序列、化學合成的寡核苷酸或是隨機的DNA片斷。
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