| dbpprop:abstract
|
- Hybridomas are cells that have been engineered to produce a desired antibody in large amounts. To produce monoclonal antibodies, B-cells are removed from the spleen of an animal that has been challenged with the relevant antigen. These B-cells are then fused with myeloma tumor cells that can grow indefinitely in culture (myeloma is a B-cell cancer). This fusion is performed by making the cell membranes more permeable. The fused hybrid cells (called hybridomas), being cancer cells, will multiply rapidly and indefinitely and will produce large amounts of the desired antibodies. They have to be selected and subsequently cloned by limiting dilution. Supplemental media containing Interleukin-6 are essential for this step. The production of monoclonal anti-bodies was first invented by Cesar Milstein, Georges J. F. Köhler and Niels Kaj Jerne in 1975. Selection occurs via culturing the newly fused primary hybridoma cells in selective-media, specifically media containing 1x concentration HAT for roughly 10–14 days. After using HAT it is often desirable to use HT containing media. Cloning occurs after identification of positive primary hybridoma cells. Clone by limited dilution. While some may believe that IL-6 is essential for this step, it is not necessary to add that expensive supplement, rather use 50% heat-inactivated FBS for the first week. Add 10% FBS DMEM to the clone culture plate after screening for single colony wells.
- Die Hybridom-Technik bezeichnet ein Verfahren zur Herstellung von monoklonalen Antikörpern (mAB). Sie wurde 1975 von César Milstein und Georges Köhler entwickelt, wofür beide Forscher im Jahr 1984 den Nobelpreis für Medizin erhielten. Bei der Hybridom-Technik werden antikörperproduzierende Zellen mit Myelomzellen fusioniert, woraufhin quasi-unsterbliche Hybride entstehen, die monoklonale Antikörper produzieren. Da B-Zellen eine limitierte Lebensdauer aufweisen, ist eine effiziente Kultivierung unter Laborbedingungen nicht möglich. Myelomazellen sind ihrerseits stark deregulierte Zellen, die nicht dem programmierten Zelltod unterliegen. Durch die Fusion beider Zelltypen können ihre Eigenschaften in Form sogenannter Hybridomzellen kombiniert werden. Diese sind nun in der Lage, uneingeschränkt monoklonale Antikörper zu sezernieren. Durch diese Technik wurde es möglich, Antikörper in großen Mengen und mit maßgeschneideter Spezifität herzustellen. Die Hauptanwendungsgebiete von monoklonalen Antikörpern liegen in der Anwendung als Arzneimittel, in der Diagnostik und in der Forschung. Folgendes Ablaufschema gibt zusammenfassend die Vorgänge bei der Hybridom-Technik wieder (siehe auch Abb.1): Immunisierung Kultivierung von Myelomzellen Gewinnung der B-Zellen Zellfusion Selektion von Hybridomazellen (HAT-Selektion) Screening nach kompetenten, Antikörper-sezernierenden Zellen
- En biotecnologia es coneix per hibridoma a aquelles cèl·lules que han estat manipulades per tal de crear un híbrid que permeti la producció de proteïnes en grans quantitats, sovint anticossos. L'híbrid està format per material genètic d'una cèl·lula "immortal" (una cèl·lula cancerígena) i el material d'una altra cèl·lula, sovint d'origen no humà, que codifica la producció de la proteïna que es vol reproduïr industrialment. Per tal de crear anticossos monoclonals que serveixin com a fàrmacs, s'extreuen limfòcits B de la melsa d'un animal (generalment un ratolí de laboratori) que ha estat sensibilitzat per a la creació d'un anticòs concret. Aquest material és fusionat amb cèl·lules tumorals de mieloma, que poden créixer indefinidament en un cultiu adient. La fusió es realitza fent que les membranes de les cèl·lules siguin més permeables. Les cèl·lules híbrides fusionades (hibridomes), essent cancerígenes, es multipliquen ràpida i indefinidament, produint grans quantitats de l'anticòs desitjat. Cal però que siguin seleccionades i posteriorment clonades per dil·lució, per tal de afinar en l'obtenció d'aquell clon que produeix l'anticòs amb major afinitat pel lligand sobre el que es pretén actuar. Sovint un medi amb Interleucina-6, com el briclone, resulta essencial per a la realització amb èxit d'aquesta pas. En qualsevol cas la selecció es realitza en un medi selectiu a partit d'un hibridoma primari.
- Línea celular híbrida obtenida mediante la fusión de un linfocito B productor del anticuerpo específico de interés, con una línea celular de mieloma que no produce inmunoglobulina propia. Se obtiene así una línea celular inmortal capaz de expresar el anticuerpo de interés, que se aísla del sobrenadante.
- Un hybridome est une cellule qui provient de l'hybridation entre des cellules lymphoïdes normales de mammifères et des cellules myélomateuses de tumeurs malignes du système immunitaire. L'intérêt est de cumuler les propriétés des deux cellules de départ : production spécifique d'anticorps pour le lymphocyte et immortalité pour la cellule cancéreuse. Les hybridomes donnent des lignées immortalisées stables productrices d'anticorps monoclonaux. Les hybridomes servent à produire en grande quantité des anticorps monoclonaux. Ceux-ci sont principalement utilisés comme réactifs dans la recherche et pour l'établissement d'un diagnostic. Dans les années à venir, ils pourraient être employés en thérapeutique, par exemple en cancérologie, pour aider l'organisme à lutter contre la prolifération des cellules cancéreuses, et dans le traitement de certaines infections.
- ハイブリドーマ(hybridoma)とは、複数の細胞が融合してできた融合細胞のこと。特にモノクローナル抗体を産生するB細胞とミエローマがん細胞の融合細胞を指すことが多い。ハイブリドーマは通常の細胞培養からも低い頻度で得られるが、融合剤を用いて強制的に融合させる手法が一般的である。融合法としては、当初はセンダイウイルスが引き起こす細胞融合が用いられたが、その後ポリエチレングリコール法や電気パルスによる電気融合法にとって替わられた。
- Hibridomas são linhagens celulares desenvolvidas para produzir um anticorpo desejado em grande quantidade. Para produzir anticorpos monoclonais, linfócitos B são removidos do baço de algum animal no qual o antígeno do anticorpo desejado tenha sido previamente inoculado. Esses linfócitos são então "fundidos" com células de mieloma, que tem a capacidade de se reproduzirem, em cultura, indefinidamente. As células resultantes dessa fusão são denominadas de hibridomas. Essas se reproduzem indefinitamente, produzindo grandes quantidades do anticorpo desejado. Uma seleção positiva, entretanto, é necessária. Essa seleção é feita pelo cultivo dos hibridomas em meios de cultura específicos e consequente separação dos clones desejados.
- Гибридо́ма — гибридная клеточная линия, полученная в результате слияния клеток двух видов: способных к образованию антител B-лимфоцитов, полученных из селезёнки иммунизированной мыши, и раковых клеток миеломы. Слияние клеток производится с помощью нарушающего мембраны агента, такого, как полиэтиленгликоль или вирус Сёндай. Поскольку раковые клетки миеломы «бессмертны», то есть способны делиться большое количество раз, после слияния и соответствующей селекции гибридома, производящая моноклональные антитела против антигена может поддерживаться долгое время.
- Hybridom är benämning på celler som har tillverkats för att producera en viss sorts monoklonal antikropp. Ett hybridom består av en B-cell som fuseras med en cancercell från ett myelom.
- Гібридома — штучна гібридна клітинна лінія, створена для отримання моноклональних антитіл у великих кількостях шляхом злиття B-лімфоцитів людини і клітин меланоми. Перед злиттям клітин, вони обробляються за допомогою агенту, що порушує мембрани, наприклад поліетиленгліколю або вірусу Сендай. Потім до B-лімфоцитів додається антиген, і вони починають виробляти антитіла. Оскільки ракові клітини меланоми «безсмертні», тобто здатні ділитися практично необмежено, після злиття і відповідної селекції отримана гибридома, що виробляє антитіла проти антигену, може підтримуватися довгий час.
|
| rdfs:comment
|
- Hybridomas are cells that have been engineered to produce a desired antibody in large amounts. To produce monoclonal antibodies, B-cells are removed from the spleen of an animal that has been challenged with the relevant antigen. These B-cells are then fused with myeloma tumor cells that can grow indefinitely in culture (myeloma is a B-cell cancer). This fusion is performed by making the cell membranes more permeable.
- Die Hybridom-Technik bezeichnet ein Verfahren zur Herstellung von monoklonalen Antikörpern (mAB). Sie wurde 1975 von César Milstein und Georges Köhler entwickelt, wofür beide Forscher im Jahr 1984 den Nobelpreis für Medizin erhielten. Bei der Hybridom-Technik werden antikörperproduzierende Zellen mit Myelomzellen fusioniert, woraufhin quasi-unsterbliche Hybride entstehen, die monoklonale Antikörper produzieren.
- En biotecnologia es coneix per hibridoma a aquelles cèl·lules que han estat manipulades per tal de crear un híbrid que permeti la producció de proteïnes en grans quantitats, sovint anticossos. L'híbrid està format per material genètic d'una cèl·lula "immortal" (una cèl·lula cancerígena) i el material d'una altra cèl·lula, sovint d'origen no humà, que codifica la producció de la proteïna que es vol reproduïr industrialment.
- Línea celular híbrida obtenida mediante la fusión de un linfocito B productor del anticuerpo específico de interés, con una línea celular de mieloma que no produce inmunoglobulina propia. Se obtiene así una línea celular inmortal capaz de expresar el anticuerpo de interés, que se aísla del sobrenadante.
- Un hybridome est une cellule qui provient de l'hybridation entre des cellules lymphoïdes normales de mammifères et des cellules myélomateuses de tumeurs malignes du système immunitaire. L'intérêt est de cumuler les propriétés des deux cellules de départ : production spécifique d'anticorps pour le lymphocyte et immortalité pour la cellule cancéreuse. Les hybridomes donnent des lignées immortalisées stables productrices d'anticorps monoclonaux.
- Hibridomas são linhagens celulares desenvolvidas para produzir um anticorpo desejado em grande quantidade. Para produzir anticorpos monoclonais, linfócitos B são removidos do baço de algum animal no qual o antígeno do anticorpo desejado tenha sido previamente inoculado. Esses linfócitos são então "fundidos" com células de mieloma, que tem a capacidade de se reproduzirem, em cultura, indefinidamente. As células resultantes dessa fusão são denominadas de hibridomas.
- Гибридо́ма — гибридная клеточная линия, полученная в результате слияния клеток двух видов: способных к образованию антител B-лимфоцитов, полученных из селезёнки иммунизированной мыши, и раковых клеток миеломы.
- Hybridom är benämning på celler som har tillverkats för att producera en viss sorts monoklonal antikropp. Ett hybridom består av en B-cell som fuseras med en cancercell från ett myelom.
- Гібридома — штучна гібридна клітинна лінія, створена для отримання моноклональних антитіл у великих кількостях шляхом злиття B-лімфоцитів людини і клітин меланоми.
|
![[RDF Data]](/statics/sw-cube.png)
