The Single Cell Gel Electrophoresis assay (also known as comet assay) is an uncomplicated and sensitive technique for the detection of DNA damage at the level of the individual eukaryotic cell. It was first described by Singh et al. in 1988. It has since gained in popularity as a standard technique for evaluation of DNA damage/repair, biomonitoring and genotoxicity testing.
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- Der Comet-Assay (auch Einzelzellgelelektrophorese genannt) ist eine Technik der Gelelektrophorese, durch die es ermöglicht wird, DNA-Schädigungen in einzelnen Zellen festzustellen. Entwickelt wurde der Assay 1984 von Östling und Johanson zum Nachweis von DNA-Doppelstrangbrüchen. Mit der Weiterentwicklung durch Singh im Jahre 1988 konnten durch die Verwendung von basischen Puffern zusätzlich auch DNA-Einzelstrangbrüche festgestellt werden. Das Prinzip des Comet-Assays beruht darauf, dass Zellen in Agarose eingebettet lysiert und einem elektrischen Feld ausgesetzt werden, der so genannten Elektrophorese. Während der Elektrophorese wandert die negativ geladene DNA zum Pluspol und dank der Poren in der Agarose trennen sich die Bruchstücke der Größe nach auf, da die kleineren Bruchstücke in bestimmter Zeit eine weitere Strecke zurücklegen als die größeren. Chromosomale DNA ist jedoch zu groß, um als Ganzes im elektrischen Feld zu wandern. Nur geschädigte, bruchstückhafte DNA ist hier in der Lage, aus dem Zellkern herauszuwandern. Unter dem UV-Mikroskop erscheinen die beschädigten Zellen, welche vorher mit Fluoreszenzfarbstoffen wie Ethidiumbromid angefärbt wurden, nun mit einem Schweif aus DNA Bruchstücken, der ihnen das Aussehen eines Kometen gibt. Beim Comet-Assay können alle Zellen verwendet werden, die einen Zellkern besitzen. Die Durchführung des Comet-Assays ist relativ einfach und schnell. Ausgewertet wird die Zahl der geschädigten und ungeschädigten Zellkerne, entweder von Hand oder durch spezielle Computerprogramme mit visueller Erfassung.
- The Single Cell Gel Electrophoresis assay (also known as comet assay) is an uncomplicated and sensitive technique for the detection of DNA damage at the level of the individual eukaryotic cell. It was first described by Singh et al. in 1988. It has since gained in popularity as a standard technique for evaluation of DNA damage/repair, biomonitoring and genotoxicity testing. It involves the encapsulation of cells in a low-melting-point agarose suspension, lysis of the cells in neutral or alkaline (pH>13) conditions, and electrophoresis of the suspended lysed cells. This is followed by visual analysis with staining of DNA and calculating fluorescence to determine the extent of DNA damage. This can be performed by manual scoring or automatically by an imaging software.
- Il test della cometa noto anche come elettroforesi su singola cellula è un test di mutagenesi per l'identificazioni di danni al DNA in una cellula. Il test è conosciuto anche con le dizioni inglesi comet assay, Single Cell Gel Electrophoresis e il suo acronimo SCGE.
- Метод ДНК-комет — это метод регистрации повреждения ДНК и изучения репарации на уровне одиночных клеток. Метод способен детектировать разрывы нитей ДНК в отдельных клетках. Является быстрым и весьма чувствительным .
- Le test des comètes (en anglais, single cell gel electrophoresis assay ou comet assay) est un test qui permet de mesurer les cassures induites directement par un agent génotoxique, indirectement lors des processus enzymatiques de réparation des dommages et enfin lors de processus secondaires de fragmentation de l’ADN tel que l’apoptose.
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- Il test della cometa noto anche come elettroforesi su singola cellula è un test di mutagenesi per l'identificazioni di danni al DNA in una cellula. Il test è conosciuto anche con le dizioni inglesi comet assay, Single Cell Gel Electrophoresis e il suo acronimo SCGE.
- Метод ДНК-комет — это метод регистрации повреждения ДНК и изучения репарации на уровне одиночных клеток. Метод способен детектировать разрывы нитей ДНК в отдельных клетках. Является быстрым и весьма чувствительным .
- Der Comet-Assay (auch Einzelzellgelelektrophorese genannt) ist eine Technik der Gelelektrophorese, durch die es ermöglicht wird, DNA-Schädigungen in einzelnen Zellen festzustellen. Entwickelt wurde der Assay 1984 von Östling und Johanson zum Nachweis von DNA-Doppelstrangbrüchen. Mit der Weiterentwicklung durch Singh im Jahre 1988 konnten durch die Verwendung von basischen Puffern zusätzlich auch DNA-Einzelstrangbrüche festgestellt werden.
- The Single Cell Gel Electrophoresis assay (also known as comet assay) is an uncomplicated and sensitive technique for the detection of DNA damage at the level of the individual eukaryotic cell. It was first described by Singh et al. in 1988. It has since gained in popularity as a standard technique for evaluation of DNA damage/repair, biomonitoring and genotoxicity testing.
- Le test des comètes (en anglais, single cell gel electrophoresis assay ou comet assay) est un test qui permet de mesurer les cassures induites directement par un agent génotoxique, indirectement lors des processus enzymatiques de réparation des dommages et enfin lors de processus secondaires de fragmentation de l’ADN tel que l’apoptose.
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- Comet-Assay
- Test della cometa
- Test des comètes
- Comet assay
- Метод ДНК-комет
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